1、药物及试剂：黑果枸杞购自亳州中药材交易中心，经安徽中医药高等专科学校林靓老师鉴定为正品。黑果枸杞花色苷由本校中药实验室自行制备，运用pH示差法测定黑果枸杞提取物中花色苷的含量为 57%；醋酸泼尼松片( 浙江仙琚制药股
份有限公司，规格每片5mg) 。将60片醋酸泼尼松片研磨成粉末，完全溶解于100mL0．9%NaCl溶液中，制成0.3%的醋酸泼尼松溶液，置于4 ℃冰箱中备用; 葡萄糖酸锌口服液
2、仪器：BX43普通光学显微镜及显微照相机( Olympus公司) ，IKA-T10组织匀浆机 ( 德国) ，酶标仪( 上海科华公司) ，
ＲE-5298A型旋转蒸发仪( 上海亚荣生化仪器厂) ，台式冷冻离心机( 德国Sigma公司) ，全自动血细胞生化分析仪( 美国贝克曼库尔特公司) 。
3、方法：分组、造模及给药将120只SD大鼠按照随机数字表法分为6组，即假手术组、模型组、醋酸泼尼松组、黑果枸杞花色苷低剂量+葡萄糖酸锌组( 简称“低剂量组”) 、黑果枸杞花色苷中剂量+葡萄糖酸锌组( 简称“中剂量组”) 、黑果枸杞花色苷高剂量+葡萄糖酸锌组( 简称“高剂量组”) ，每组20只。除假手术组外，其余各组均采用改良的 Allen’s 法建立ASCI大鼠模型。具体方法: 腹腔注射氨基甲酸乙酯2.2mL/ kg麻醉大鼠，手术完全暴露T9-T11的双侧椎板，暴露的脊髓长度约5mm，并且从3.5cm的高度自由落下10g重的圆柱形击球器以击中暴露区域，大鼠下肢抽搐几次，然后瘫痪，硬膜下充血、水肿，提示 ASCI 模型复制成功。
观察指标及方法：包括以下几个方面：
1) 神经功能评估。采用脊髓损伤行为学评分评估各组大鼠神经功能恢复情况。分别于给药12h、1d、3d、7d、14d将大鼠置于2.00m×2.00m的空旷之地自由活动，观察各组大鼠运动期间髋、膝、踝关节的行走，躯干运动和大鼠的协调情况，由2位熟悉BBB评分规则但非本实验研究人员进行评分。
2) 血清TNF-α、IL-6含量测定。分别于给药12h、1d、3d、7d、14d麻醉大鼠，取腹主动脉血约5mL，4℃下离心( 1000r/min) 12min，分离血清，严格按照ELISA试剂盒说明书的步骤检测血清TNF-α、IL-6含量。
3) 脊髓组织病理形态学观察。每组取4只，分别于给药 12h、1d、3d、7d、14d麻醉处死大鼠，暴露脊髓，在距离受损脊髓中心5mm的高度切断脊髓，然后置于4%多聚甲醛固定，石蜡包埋，切片，进行HE染色，光学显微镜下观察。
以上内容仅供大家参考。
