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利用上海亚荣RE52AA减压除去有机溶剂方法

2019-08-02 15:28 

文中,分析了聚乳酸纳米粒的制备方法,上海亚荣生化仪器厂先从本次实验所需要的仪器设备试剂出发,在简单介绍了利用本厂生产的RE-52AA旋转蒸发器对有机溶剂去除的方法。本实验制备去氢骆驼蓬碱聚乳酸纳米粒,对其体外基本性质进行初步研究,并考察其药动学行为,为该成分开发利用提供参考。 

1、材料
上海亚荣RE52AA旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂);Agilent 1260型高效液相色谱仪 ( 美国Agilent公司);GL124-1SCN电子天平,赛多利斯科学仪器(北京)有限公司;涡旋混合器( 海门市其林贝尔仪器制造有限公司);JY92-II型超声仪 ( 宁波新知科仪器研究所);YC-1200型台式冷冻干燥 ( 北京亚星仪科科技发展有限公司);Master-sizer型粒度分析仪 ( 英国马尔文仪器有限公司);D200-2型氮气吹扫仪 ( 杭州奥威仪器有限公司)。去氢骆驼蓬碱对照品 ( 批号 20170115,南京泽朗医药科技有限公司,含有量>98%) 。聚乳酸( 分子量15000,批号 2016081715,山东岱罡科技有限公司) ; Poloxamer188 ( 德国巴斯夫公司,含有量>98%) 。甲醇为色谱纯;其他试剂均为分析纯。SD大鼠,雌雄兼具,体质量 ( 300±20) g,购自上海斯莱克实验动物有限公司,许可证号SCXK ( 沪) 2012-0002。 

2 、方法与结果
2. 1 、去氢骆驼蓬碱含有量测定
色谱条件 WatersC18色谱柱 (25mm×4.6mm,5μm);流动相甲醇-0.2%甲酸 ( 55:45);检测波长248nm;体积流量1.0mL/min;柱温35℃;进样量20μL。
线性关系考察精密称取去氢骆驼蓬碱对照10.0mg,置于10mL量瓶中,加入适量甲醇超声溶解,室温下放置40min后甲醇定容,利用赛多利斯GL124-1SCN电子天平精密量取适量,甲醇稀释成20.0、10.0、5.0、0.5、0.05μg/mL,在色谱条件下进样测定。以峰面积 ( Y) 对溶液质量浓度 ( X) 进行回归,得方程为Y=1.2124X+0.0093 (r=0.9999),在0.05~20.0μg/mL范围内呈良好的线性关系。
方法学考察:取0.05、5.0、20.0μg/mL对照品溶液,在色谱条件下进样测定5次,测得3种质量浓度下日内精密度RSD分别为0. 43%、0. 19%、0. 17%,日间精密度 ( 连续测定5d,每天1次) RSD分别为0.82%、0.37%、 0.15%。取空白纳米粒混悬液或1.0%十二烷基硫酸钠水溶液1mL,加入0.5、5.0、20.0μg/mL对照品溶液各1mL,测得去氢骆驼蓬碱平均加样回收率为99.71%,RSD小于1.76%。

2. 2、 利用上海亚荣RE-52AA旋转蒸发器对聚乳酸纳米粒制备
用赛多利斯电子天平精密称取去氢骆驼蓬碱20mg、聚乳酸160mg,溶于25mL丙酮-乙醇等比例混合溶液中,注射器缓慢加到50mL 含0.25%Poloxamer188的水相中,超声10min,置于上海亚荣RE-52AA旋转蒸发器中减压旋蒸除去有机溶剂,浓缩,离心60min ( 25000r/min) ,沉淀物用上海亚荣SZ-93A纯水蒸馏水器制备的蒸馏水洗涤后定容至10mL,以5%甘露醇为冻干保护剂,-70℃下预冻48h,挂入冷冻干燥机中制备,即得,以去氢骆驼蓬碱计,含有量为2.88%。同法制备空白聚乳酸纳米粒。
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