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那些您不知道的方法之从小球藻中蒸发提取油脂

返回列表 来源:未知 发布日期:2019-09-26 11:19【
 下面,上海亚荣生化化仪器厂先介绍旋转蒸发提取小球藻所需要用到的材料和生化仪器,接着了解了这些之后,我们在简单介绍了旋转蒸发器提取小球藻的温度设定以及简单的实验方法,这样,让大家更深刻的了解,并学以致用。
1、旋转蒸发提取小球藻油脂的材料和仪器
上海亚荣旋转蒸发器RE-2000A、红外光谱仪、超声波清洗器等生化仪器;小球藻,为了培养该菌株,使用BG11培养基。将约100mL预培养液接种到含1.0L培养基的垂直管状光生物反应器中。垂直管状光生物反应器由高70.0cm、外径5.0cm的玻璃管组成。光由生物反应器一侧的白色冷荧光灯(恒兴公司,24W)提供,光强度200±50μE/(m2·s)。通过玻璃过滤器富含6.0%CO2的压缩空气实现充气和混合,玻璃过滤器插入反应器底部。培养基的温度为25±1℃,由室内空调调节。

2、旋转蒸发提取小球藻的油脂的分析条件
分别测量总油,蛋白质和糖含量。小球藻中油脂、蛋白质和糖的含量。纤维素酶,其从青霉菌的发酵液中提取。酶蛋白占10.08%(g/g干质量)。从获得的果胶酶和半纤维素酶是从黑曲霉培养物的发酵中提取的。在这些物质中,蛋白质分别占8.70%和4.17%(g/g干质量)。之后提取,根据国际纯粹与应用化学联合会(IUPAC)的生物技术委员会的方法测量纤维素酶的滤纸酶活性。通过描述的方法评估果胶酶活性。测量的木聚糖酶活性分析半纤维素酶活性。纤维素酶的滤纸酶活性为7.2U/mg蛋白质。果胶酶和半纤维素酶的酶活性分别为500U/mg蛋白质和1.5 U/mg蛋白质。

3、那么旋转蒸发提取油脂的测定条件如何呢?
酶水解在含30mL缓冲溶液的100mL锥形瓶中进行。将酶处理在水浴振荡器中以150r/min培育72h。酶浓度2.0%。酶水解处理后,向各样品中加入20mL己烷,获得的悬浮液通过涡旋混合器混合。将悬浮液在25℃下以5000r/min离心5min。将上清液转移至上海亚荣蒸发烧瓶中。通过设定在上海亚荣30℃真空旋转蒸发器RE-2000A中除去上清液的溶剂。将残余物在30min内再萃取2次。将烧瓶冷却并称重以确定油脂含量在。油脂提取过程中,加入0.01%丁基化羟基甲苯(BHT)作为抗氧化剂。X-射线衍仪检测。采用X-射线衍射仪(D/max II B)。测量条件:X-射线管电流/电压30MA/40kV;Cu靶;扫描速度40/min。FT-IR红外光谱检测。用溴化钾压片法将样品FT-IR红外光谱仪上测IR谱图,通过与标准样品比较确定结构。小球藻的油脂提取可以通过酶辅助提取直接进行。藻类浓度对油脂提取率的影响最大,其次是温度和酶混合物的比例。酶混合物对小球藻细胞的完整性具有显着影响,并且酶水解后结晶指数从30.7%增加至约36.0%。小球藻具有较高的纤维素Iα含量和较低的结晶指数,有利于酶辅助水解法提取油脂。
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