茶叶有很多种，女性一般都比较喜欢喝绿茶和红茶居多，茶叶作为一种传统健康饮品，含有茶多酚、茶多糖等多种具有降血糖作用的天然生物活性成分，同时研究表明，绿茶、红茶、黑茶、乌龙茶、黄茶等茶产品均具有降血糖作用。来今天和上海亚荣生化仪器厂的小编一起来学习下茶叶样品的前处理方法和用到的仪器设备。
1、材料、试剂与仪器设备
先学习下茶叶样品分析实验需要用到的仪器设备：多功能酶标仪（赛默飞世尔上海仪器有限公司）、MIKRO22R型台式冷冻离心机（德国Hettich公司）、电子天平（梅特勒-托利多仪器上海有限公司）、电热恒温水浴锅（上海精宏实验设备有限公司）、冷冻干燥机（广州三元科技有限公司）、高速匀浆机（中国赛默飞世尔科技公司）、RE-3000A旋转蒸发器（上海荣亚生化仪器厂）、高效液相色谱仪（美国安捷伦公司）、紫外分光光度计UV-2550（日本岛津公司）。
试验动物：SPF级KM小鼠90只，雄性，(20±2) g。
材料：红茶及发花红砖茶均由湖南武陵秀峰茶业有限公司生产加工。
试剂：盐酸二甲双胍片，购于中美上海施贵宝制药有限公司；链脲佐菌素购于美国Sigma公司；总胆固醇、甘油三酯、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶试剂盒购于南京建成物工程研究所；超氧化物岐化酶、丙二醛、肝糖原试剂盒购于苏州科铭生物有限公司；其他试剂均为分析纯。
2、用上海亚荣旋转蒸发器对茶叶样品的前处理试验方法
茶样前处理方法：称取红茶和发花红砖茶各600g，分别粉碎后，按茶水比110：在沸水浴中提取30min，浸提2次，过滤，合并滤液于上海亚荣RE-3000A旋转蒸发器中55℃下旋转蒸发浓缩至固形物含量约30%后，冷冻干燥分别得干粉143.50g与147.70g，铝箔袋收集干粉，放入冰箱保存。经检测，红茶干粉中茶多酚、咖啡碱、简单儿茶素、酯型儿茶素、儿茶素总量、茶黄素、茶红素、茶褐素含量分别为 31.30%、10.24%、1.30%、1.69%、3.29%、1.55%、19.61%、22.67%；发花红砖茶干粉中茶多酚、咖啡碱、简单儿茶素、酯型儿茶素、儿茶素总量、茶黄素、茶红素、茶褐素的含量分别为 30.90%、 11.44%、1.61%、1.19%、2.80%、1.22%、19.18%、29.70%。
高血糖小鼠模型的方法建立：购买SPF级雄性小鼠，20只，20g左右，自由饮食，适应性喂养3~5d。禁食16h，测其空腹血糖值和体重，按照体重值确定所需链脲佐菌素量，配置溶液，腹腔注射50mg·kg-1，连续注射5d，每天1次。最后一次注射结束后，禁食16h，测定血糖值，血糖值高于11.1mmoL·L-1视为造模成功；同时观察记录小鼠的体重、饮水、饮食等生理变化。称取0.1~0.2g小鼠肝脏组织，加入0.75mL试剂盒中的提取液充分匀浆；转移至10mL 试管中；95℃水浴 20 min，每隔5min振摇试管1次，使充分混匀；待组织液全部溶解后，取出试管冷却后，用上海亚荣生化仪器厂生产的SZ-96A蒸馏水器制备的蒸馏水定容到5mL，混匀，8000r·min-125℃离心10min，取上清液测定肝糖原。按以下步骤依次进行：60℃下烘烤载玻片 1~2 h；切片脱蜡至水化，先将切片置于二甲苯中 10min，重复2次，然后将切片依次放入 100%、95%、85%和75%乙醇中，每级放5min，再用蒸馏水浸洗5min；将切片用苏木素染色5~10min，蒸馏水冲洗，再用 PBS 返蓝；用伊红染色 3~5 min，蒸馏水冲洗；酒精梯度（95%~100%）脱水，每级5min，然后取出后置于二甲苯10min，重复2次，用中性树胶封片后于显微镜下观察。
好了今天亚荣的小编就介绍这么多，以上内容仅供参考，欢迎大家咨询购买上海亚荣旋转蒸发器RE-3000A。
