1、上海亚荣介绍糜子米成分鉴定所需的材料与方法
材料、仪器与试剂:DHG-9123A型电热恒温鼓风干燥箱(上海-恒科技有限公司);FW-100(40~200目)粉碎机(北京市永光明医疗仪器厂);RE-52AA旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂);Anke TDL-5-A离心机(上海安亭科学仪器厂);QP-2010 GC-MS型气相色谱-质谱联用仪(日本岛津公司)。生塔尔米全粉(塔尔米由新疆塔城托里县达尔汗农产品购销农民专业合作社提供,通过粉碎机磨粉,过60目筛,得到生塔尔米全粉)。硫酸铜(康泰化工有限公司);茚三酮(上海迈坤化工有限公司);酒石酸钾钠(葵邦化工有限公司);乙醇(上海洋捷贸易有限公司);硝酸铋(上海龙津金属材料有限公司);碘化钾(郑州蓝翔化工);甲醇(上海洋捷贸易有限公司);硅钨酸(上海迈坤化工有限公司);三氯化铁(深圳迈顿科技有限公司)。试剂均为分析纯。
2、上海亚荣介绍本次实验的方法
有效成分定性试验:冷水提法:取适量的塔尔米粉,浸泡到水中,过夜冷藏,进行离心,取滤液测定氨基酸、多肽、蛋白质、多糖。热水浸提法:冷水提取液滤取后,用剩余滤液、残渣在上海亚荣旋转蒸发器RE-52AA水浴50~60℃下浸提1h,过滤得热水浸提液滤,检测糖、多糖、皂苷、苷类、有机酸等成分。乙醇提法:称取塔尔米粉末,加入10倍量的乙醇,回流提取1h,过滤,置于上海亚荣旋转蒸发器中减压浓缩至约50mL,检测黄酮类化合物、蒽醌类、香豆素、内酯、甾体及三萜类、强心苷、有机酸、酚类与鞣质等成分。酸性乙醇提取法:称取塔尔米粉末,加入10倍的0.5%酸性乙醇,水浴回流10min,过滤,用滤液检测生物碱。石油醚提取法:称取塔尔米粉末,加10倍的石油醚,在室温下浸泡2h,然后进行过滤,滤液供检测挥发油、油脂类。
3、上海亚荣介绍糜子米油的脂肪酸组成分析
样品预处理:将塔尔米油进行甲酯化处理,利用GC-MS分析其脂肪酸组成成分。
甲酯化处理:吸取3 mL塔尔米油于试管中,加入5mL石油醚-乙醚(4:3,V/V)混合溶液,放入4mL0.5moL/L氢氧化钾-甲醇溶液,振荡,静置10~15min,加入蒸馏水(用上海亚荣自动纯水蒸馏水器制备可得),静置分层,取上清液进样分析。
GC-MS试验条件:GC条件:色谱柱Agilent 7890B GC-5977AMS毛细管柱(60mm×0.25mm×0.5μm)。程序升温:初始温度40℃,保持5min,程序升温10℃/min,升温至250℃,保持10min,溶剂延迟10min,程序升温5 ℃/min,升温至250℃,保持3min。进样口温度280℃,柱前压43kPa,载气氦气,进样量0.4μL,分流比30∶1,载气流速1mL/min。MS条件:EI离子源,源温230℃,电子能量70eV,连接器温度250℃,质量扫描范围(m/z)30~500。
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