关于氨基酸的测定，有以下方法，首先我们跟着上海亚荣生化仪器厂小编一起来了解下有关于本次实验需要的材料和方法，在分享实验方法。
1、材料与方法
试验仪器：上海亚荣生化仪器厂生产的RE-2000A旋转蒸发器、日本岛津高效液相色谱仪(配博纳艾杰尔Venusil氨基酸分析专用柱，长250mm，内径4.6mm，粒径5μm)；pH计 (pHS-3D，上海精密科学仪器有限公司)；冷冻干燥机 (FD-1C-50，北京博医康实验仪器有限公司)。
2、氨基酸含量的测定
采用高效液相色谱柱前衍生方法进行测定。样品前处理：称取 (0.15±0.0001) g绝干样品 (样品氨基酸总量在50～75mg范围内) 完全转移至10mL安瓿瓶中。往安瓿瓶内加入10mL含0.1% 苯酚的6mol/L盐酸溶液，加入过程中将吸附在管壁上的样品冲下去，且样品要完全浸泡。用喷灯将管口封严，置于 (110±1) ℃ 烘箱中水解24h。水解完全后取出安瓿瓶，待其冷却后切开，用定量滤纸过滤至石英坩埚内，用少量去离子水冲洗安瓿瓶3次。将石英坩埚内的水解液用上海亚荣RE-2000A旋转蒸发器设置70℃水浴蒸干，加入1mL/0.02 mol/L的盐酸，溶解后继续置于上海亚荣旋转蒸发器RE-2000A中水浴蒸干；加入1mL/0.02mol/L的氢氧化钠，静置1h，再次水浴蒸干。用0.02mol/L的盐酸稀释并转移至50mL容量瓶中，用该浓度盐酸定容至刻度。氨基酸标准溶液的配制：将胱氨酸配制为1.25mol/mL，其余氨基酸配制成2.5μmol/mL的标准溶液。
氨基酸标准溶液和样品溶液的衍生：准确量取氨基酸标准溶液和样品溶液各200μL，分别置于1.5mL离心管中。向每个离心管中准确加入20 μL正亮氨酸内标溶液。分别加入三乙胺乙腈溶液100μL、异硫氰酸苯酯乙腈溶液100μL至各离心管中，混匀，室温静置1h后加入正己烷400μL至各离心管，震荡后静置10min。取下层溶液200μL，加 800μL超纯水稀释，摇匀，用天津津腾0.22μm针头滤器过滤至自动进样瓶中，上机检测。色谱分析条件：色谱柱为博纳艾杰尔氨基酸分析专用柱，长250mm，内径 4.6mm， 粒径5μm。柱温：40℃；进样量：20μL；检测器：紫外检测器 (SPD-20A)，检测波长为254nm。流动相A：称取15.2g无水乙酸钠，加水1850mL，溶解后用冰醋酸调pH至6.5，然后加乙腈140mL，混匀，用天津津腾0.22μm滤膜过滤。流动相B：80% 乙腈水溶液，流动相流速及二元高压洗脱梯度：流速为1.00mL/min。定量测定及结果计算：分别测定氨基酸标准溶液和样品溶液，得到氨基酸混合标准溶液和样品溶液中各氨基酸的峰面积。
上海亚荣生化仪器厂在文中通过分析发现每种蛋白原料与菲牛蛭蛭体氨基酸的关联系数及关联度存在明显的差异，可优选灰色关联度高的蛋白饲料原料开发菲牛蛭人工配合饲料，综合考虑饲料配方、加工工艺、饲养管理等影响因素以提高菲牛蛭对饲料蛋白质的消化率，从而提高氨基酸的利用，为开发菲牛蛭氨基酸平衡人工饲料提供参考。
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