上海亚荣生化仪器厂生产的RE-2000A是性价比极好的一款2L旋转浓缩仪，最小可连接50ml蒸发瓶，水浴锅升温快，加热管为密闭式。在文中介绍利用酶标仪法测定透过液中的淫羊藿苷含量，利用中药复方水提醇沉置于旋转蒸发器中浓缩液制备中药软膏剂。
1、材料与方法
1.1、本厂实验所需要的主要生化仪器设备：TP-2A（3 杯）型智能药物透皮扩散试验仪，上海互佳仪器设备有限公司产品； SynergyMx多功能酶标仪，美国伯腾仪器有限公司产品；YF20/1+1（250）型中药煎药包装机，北京东华原医疗设备有限责任公司产品；上海安亭科学仪器厂离心机、分析天平， 上海佑科仪器仪表有限公司产品；RE-2000A型旋转蒸发器，上海亚荣生化仪器厂产品。
1.2、 试验材料：复方中药软膏剂由淫羊藿、肉桂、雄蚕蛾、菟丝子、补骨脂、山药、山茱萸、 枸杞、熟地、杜仲等药物按照一定比例组成，上述中药均购自内蒙古自治区呼和浩特市惠丰堂大药房；淫羊藿苷标准品，购自北京索莱宝生物科技有限公司；硬脂酸、单硬脂酸甘油酯、水杨酸、白凡士林、石蜡、羊毛脂、吐温-80、羟基脂肪酸甘油酯、苯甲酸钠、硫化钠、氮酮、75%酒精，均购自天津致远化学试剂有限公司。马皮肤样本：采集蒙古马离体背侧皮肤。
1.2 、试验方法：标记物含量检测方法的建立： 由于中药透皮软膏为中药复方制剂，成分十分复杂，很难测定所有药物有效成分的具体透皮量，因此，一般以其中某种有效成分的透皮量作为评价透皮效果的指标。 该研究选取的药物有效成分为淫羊藿苷，为该中药透皮软膏复方制剂的主要组分。 根据相关文献报道，淫羊藿苷标准品在λ=278nm处有最大吸收，即在扫描波长为278nm时，其吸光度值（OD 值）可达到最大值。 以淫羊藿苷的吸光度值为纵坐标，以系列标准溶液的浓度为横坐标，进行线性回归，制作并绘制标准曲线。 根据比尔—朗伯定律 A=aLc，计算待测样本中的淫羊藿苷浓度。其中，吸收层厚度 L 为1cm；根据a=M/10×E，M为吸光物质摩尔质量，E为自然常数，淫羊藿苷标准品摩尔吸收系数a=1.495×103 L/（mol·cm），代入吸光度值A即可计算出相应浓度。 得到的回归方程为：y= 0.066x-0.00005，R2= 0.999。
1.3、 体外透皮试验 软膏剂的制备及稳定性评价：将肉桂、淫羊藿、菟丝子、补骨脂、山药、山茱萸、枸杞、熟地、 杜仲等中药按照一定比例混合，以水提醇沉法，将中药于中药煎药机内煎煮3次，每次1h。 合并3次煎煮获得的药液，置于上海亚荣RE-2000A旋转蒸发器中真空浓缩至固液比至 1∶1~1∶1.2。 将浓缩药液梯度醇沉，使含醇量分别达到 60%、 70%、75%、80%，醇沉间隔时间为24h。 雄蚕蛾单独进行提取。 将一定量雄蚕蛾研碎后于70~75℃烘干，按照固液比1∶4 加入60%乙醇萃取24~48h，每隔6h搅拌1次。 萃取后真空抽滤，再用同浓度酒精冲洗残渣 1~2次，合并滤液。 将中药醇沉液和雄蚕蛾醇沉液混合后， 置于旋转蒸发器RE-2000A中真空减压浓缩至黏稠干浸膏。 软膏剂基质的制备方法是将硬脂酸、单硬脂酸甘油酯、凡士林、羊毛脂、液体石蜡按照一定比例混匀，80℃水浴形成油相；将羟基脂肪酸甘油酯、吐温-80、苯甲酸钠和适量的蒸馏水（可选用上海亚荣生化仪器厂生产的SZ-93A蒸馏水器制备）按一定比例混合，80 ℃水浴形成水相。待二者在水浴条件下均形成液态状后，将油相倒入水相并迅速搅拌。 再将 一定量的水杨酸加入上述混合液中， 混合均匀后倒入干浸膏中。 搅拌至软膏质地均匀、 肉眼无杂质、无块状物后自然冷却，常温下备用。 软膏剂应均匀、细腻， 并且具有适当的黏稠性，容易涂布于皮肤或黏膜表面，并且无刺激或刺激性非常小。 取制备的少量软膏约1g，置于玻璃板中间，用同样大小的玻璃板将其覆盖， 夹紧四周，于日光下观察，软膏应无颗粒状，色泽均匀，质地细腻；软膏剂应具备良好的稳定性。 将软膏装入离心管中， 分别于55℃恒温放置9h、-15℃恒温放置 24h，处理后软膏应无液化、粗化、分层等现象；3000 r/min离心30min，应无分层现象。
1.4、离体皮肤处理：将马匹背侧皮肤在8%硫化钠溶液浸润、擦拭后，刮去脱落的毛发，去除皮下多余脂肪，用生理盐水冲洗干净，选取相对平整的部位。 样品处理完毕后24h内使用。
1.5、透皮试验： 将处理好的马皮肤随机选取几块，剪成适当大小，固定在扩散池盖（供给体）与扩散池（接受体）之间，皮肤的内表面沉浸在等渗溶液中，用上海亚荣生化仪器厂恒温循环水保持扩散池的恒温工作状态，用恒速磁力搅拌确保等渗溶液的均匀分布。 接 收液为生理盐水，恒温水浴温度为37.5℃。选取4份等量的软膏剂，分为4组，A组为加入2%氮酮组，B组为加入4%氮酮组，C组为加入5.5%氮酮组，D组为加入7%氮酮组。 将透皮剂与软膏剂在半液体状态下搅拌混匀后倒入物料口， 使之与待测皮肤充分接触，调节好透皮仪水温，分别于处理后1、5、9h从加料口取出15mL接收液， 然后用等量的生理盐水补满接收瓶内液体， 使皮肤内表面无气泡且可以与接收液充分接触。
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